bodu.com

技术总监/经理博客

正文 更多文章

无菌车间蝴蝶兰的组织培养

无菌车间蝴蝶兰的组织培养

无菌车间蝴蝶兰外植体及其灭菌接种,剪取授粉后110-120d的蒴果,表面用自来水洗净,然后用浸过70%酒精的纱布擦拭干净,再用0.1%HgCl2灭菌12-15min,用无菌水冲洗4-5次,最后用无菌滤纸吸干果皮外的水,于无菌条件下在超净工作台上切开蒴果,刮出种子,接种于培养基中。种子萌发前用散射光照射,萌发后置于光强2000-3000Ix的光下,14h/d,温度(25±1)℃,其他培养条件为光强2000Ix8-10h/d,温度为(25±1)℃。

无菌播种10D后胚明显膨大,呈淡黄色,个别呈淡黄色小球体;15D后小球体陆续出现,20D后可以用肉眼明显看到,25D后约有40%-50%萌发,呈黄绿色,30D75%以上的原球茎呈绿色,45D后发芽率为85%,且形成第一片叶,60D后形成第二片叶,转移到新的培养基上形成再生植株。试管苗出瓶前先将封口打开,让试管适应外部环境,出瓶的小苗要先用清水将附在小苗上的培养基洗干净,栽植在洁净的水苔上,置于阴凉处,注意保持基质湿润、环境湿度和通风,1个月后小苗生长稳定,开始喷施液肥,等到小苗有新叶长出时,便可移植到小盆上,出瓶后的植株一般1.5-2年便可以开花。中净环球净化可提供无菌车间、无菌室的咨询、规划、设计、施工、装修改造等配套服务。

        

茎尖培养,在无菌超净工作台上借助体视显微镜剥取茎尖,茎尖大小一般为0.5-1mm,太小则不容易成活,太大只形成单芽而不能形成丛生芽或原球芽,茎尖培养形成圆球茎可采用MS+BA3-5mg/L+椰子汁15%培养基,原球茎及丛生芽的增殖采用MS+BA3mg/L+椰子汁15%培养基;形成足够繁殖基数后把比较大的芽(3-4cm长)移植到成苗培养基上,30-40D就可以长根,经过炼苗后就可以进行加植。花梗接种诱导培养基后30D左右即可萌发成单芽或丛生芽,这主要决定于激素的量以及外植体的生理状态,如果激素偏高、外植体处于幼嫩状态,则容易产生丛生芽,否则只产生单芽;形成丛生芽后多次切割并移栽到增殖培养基后就可以大量增殖,一般45D作为一个继代周期,增值率在3-4倍既可以满足生产上的需要,形成足够繁殖基数后把比较大的芽3-4CM长移植到成苗培养基上,30-40D就可以长根,经过炼苗后就可以进行假植。

本文由中净环球CCG(www.ccg-sz.com)提供,转载请注明出处。

分享到:

上一篇:药厂洁净车间安瓿干燥灭菌设备

下一篇:无尘车间固体饮料安全生产控制

评论 (0条) 发表评论

抢沙发,第一个发表评论
验证码